【摘 要】
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本研究的主要目的是通过茎尖培养的技术手段来探索蝴蝶兰病毒的脱除问题,为建立工厂化无毒苗培养体系提供技术支撑.长期的工厂化生产,使蝴蝶兰经常感染各种病毒,导致叶片产生枯斑、褪绿、坏死等现象,使花朵畸形变色.其中建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)是最常见的2种病毒.实验取已检测出含有CymMV和ORSV病毒的蝴蝶兰植株花梗,进行诱导丛生芽的培养,对丛生芽进行继代增殖形成组培苗用于脱毒处理.切取组培苗的茎尖顶端分生组织进行培养,茎尖长度在1～6mm之间,随着茎尖长度的增加,成活率上升,脱毒率明
【机 构】
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苏州市农业科学院/太湖地区农业科学研究所,江苏苏州215000
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本研究的主要目的是通过茎尖培养的技术手段来探索蝴蝶兰病毒的脱除问题,为建立工厂化无毒苗培养体系提供技术支撑.长期的工厂化生产,使蝴蝶兰经常感染各种病毒,导致叶片产生枯斑、褪绿、坏死等现象,使花朵畸形变色.其中建兰花叶病毒(CymMV)和齿兰环斑病毒(ORSV)是最常见的2种病毒.实验取已检测出含有CymMV和ORSV病毒的蝴蝶兰植株花梗,进行诱导丛生芽的培养,对丛生芽进行继代增殖形成组培苗用于脱毒处理.切取组培苗的茎尖顶端分生组织进行培养,茎尖长度在1～6mm之间,随着茎尖长度的增加,成活率上升,脱毒率明显降低.取2～3 mm组培苗茎尖,经0、10、20、30、40 mg/L的三氮唑核苷浸泡15 min处理和在含有相应浓度的三氮唑核苷培养基中培养30天后,继代培养形成再生植株.实验采用ELISA法对脱毒前的蝴蝶兰植株以及脱毒后的再生植株进行2种病毒检测,通过显色反应判断是否含有病毒病原.实验结果表明,蝴蝶兰脱毒苗的成活率随着三氮唑核苷浓度的增加而降低,当其浓度达到40 mg/L时,茎尖顶端分生组织出现严重的透明和褐变现象,未获得再生植株.而试管再生苗的脱毒率则随着三氮唑核苷浓度的升高而增加.在添加30mg/L的三氮唑核苷进行化学抑制病毒的处理后,可以比单纯使用茎尖培养的方式脱毒率提高22.3％.
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