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为构建结核分枝杆菌毒素‐抗毒素系统 m azEF6缺失突变株，并对其表型进行初步探讨，首先用聚合酶链反应（PCR）分别从H37Rv标准株和PUC‐19K质粒扩增出 mazEF6基因的同源臂及卡那霉素抗性基因kan ；然后应用融合PCR技术将 mazEF6基因的同源臂与 kan基因进行杂交拼接，获得目的融合片段，将该融合片段克隆于pMD‐19T（simple）载体形成自杀质粒pMD‐19T‐ΔmazEF6‐kan ，并将自杀质粒转化至大肠埃希菌DH5α中；最后利用电穿孔技术将自杀质粒电转至H37Rv标准株中