【摘 要】
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应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组乳酸杆菌. 将pGFP2质粒中的绿色荧光蛋白基因切下,克隆进表达载体质粒pThioHisB的NcoⅠ和SacⅠ位点之间,构建成重组表达质
【机 构】
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广东省农业科学院农业生物技术研究所,广东省农业科学院农业生物技术研究所
【基金项目】
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广东省广州市科技攻关项目，广东省农业科技攻关项目
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应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组乳酸杆菌. 将pGFP2质粒中的绿色荧光蛋白基因切下,克隆进表达载体质粒pThioHisB的NcoⅠ和SacⅠ位点之间,构建成重组表达质粒pThioGFP,然后转化大肠杆菌BL21. 从BL21中提取重组质粒,用电击法转化乳酸杆菌Lac1001,当细菌处于D600 nm为0.6的生长期时,使用PEB作为电击缓冲液,对100 μL体积的细胞悬液在电容25 μF,电阻200 Ω,电压2.2 kV的电击条件进行完整质粒转化可得到较高的转化率. 电击转化后L
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