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摘 要：本文采用高校液相测定了复方醋酸曲安奈德软膏中醋酸曲安奈德和氯霉素的含量，固定相为：安捷伦Cl8（4.6mm×250mm，5um），以乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）为流动相，检测波长为240nm；氯霉素在1～16mg·mL-1范围内呈良好的线性关系；醋酸曲安奈德在0.1～1.6mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。氯霉素和醋酸曲安奈德的平均回收率分別为99.7%、99.6%，RSD为0.67%（n=6）、0.72%（n=6）；此方法简便、准确、重现性好，可用于复方醋酸曲安奈德软膏中氯霉素和醋酸曲安奈德的含量测定。
关键词：复方醋酸曲安奈德软膏；氯霉素；醋酸曲安奈德
醋酸曲安奈德作用与氢化可的松的相似，抗炎强度为氢化可的松的5-20倍，且抗炎作用和抗过敏作用强、较持久，水钠潴留作用较强[1-5]。氯霉素化学中文名称为D-苏式-（-）-N-[α-（羟基甲基）-β-羟基-对硝基苯乙基]-2，2-二氯乙酰胺。氯霉素（chloramphenicol，chloromycetin）是由委内瑞拉链霉菌产生的抗生素。氯霉素属抑菌性广谱抗生素。氯霉素用于治疗由伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、肺炎球菌等引起的感染。本文采用高校液相测定了复方醋酸曲安奈德软膏中醋酸曲安奈德和氯霉素的含量。
1 仪器与试药
YP1004万分之一电子分析天平（南京麒麟分析仪器有限公司）；SK3300HP功率可调台式超声波清洗器（上海垒固仪器有限公司）；SPCC-420E 国产全自动实验室洗瓶机（东莞市谱标实验器材科技有限公司）；Heraeus Multifuge X1高性能通用台式离心机（赛默飞世尔科技实验室产品）；Barnstead GenPure 超纯水仪（北京五洲东方科技发展有限公司）；LC98II高效液相色谱仪（北京温分分析仪器技术开发有限公司）；依利特ZW230Ⅱ色谱柱温箱（大连依利特分析仪器有限公司）。氯霉素和醋酸曲安奈德对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（上海甲美精细化工有限公司）、甲醇（天津市彪仕奇科技发展有限公司）、十二烷基硫酸钠（济南汇丰达化学有限公司）、醋酸钠（衢州瑞尔丰化工有限公司）、磷酸二氢钠（衢州瑞尔丰化工有限公司）、三乙胺（寿光市鲁科化工有限责任公司）、丙酮（天津市彪仕奇科技发展有限公司）、四氢呋喃（天津市彪仕奇科技发展有限公司）、磷酸（寿光市鲁科化工有限责任公司）、乙醚（天津市彪仕奇科技发展有限公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果 ，确定色谱条件如下。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）；检测波长为240nm；流速1.0mL·min-1；柱温：30℃。理论板数按醋酸曲安奈德峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取复方醋酸曲安奈德软膏适量，精密量取，置50mL量瓶中，加流动相适量，超声处理十分钟，放置至室温，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.3 对照品溶液的制备
分别精密称取醋酸曲安奈德和氯霉素对照品5mg、100mg，置10mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.4 标准曲线的制备1mg·mL-1、2mg·mL-1、4mg·mL-1、8mg·mL-1、16mg·mL-1制备浓度为1～16mg·mL-1的氯霉素对照品溶液，制备浓度为0.1mg·mL-1、0.2mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.8mg·mL-1、1.6mg·mL-1的醋酸曲安奈德对照品溶液。分别按氯霉素、醋酸曲安奈德的测定参数继续测定。以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，氯霉素在1～16mg·mL-1范围内呈良好的线性关系；醋酸曲安奈德在0.1～1.6mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验
依照2.3项下制备对照品溶液，分别精密吸取氯霉素和醋酸曲安奈德对照品溶液重复测定6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD分别为0.71%和0.72%。结果表明，本实验精密度良好。
2.6 重现性试验
分别称取同批复方醋酸曲安奈德软膏样品6份，分别依照2.2项下供试品制备方法制备供试品，按质量标准含量测定项下方法测定含量，并计算样品的RSD值，RSD值为0.66%，0.68%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.7 专属性试验
取白凡士林、单硬脂酸甘油、磷脂酸、丙酮、十二烷基硫酸钠、羟苯乙脂等辅料制成阴性对照样品，照2.2项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在氯霉素与醋酸曲安奈德出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.8 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时进样测定，供试品氯霉素和醋酸曲安奈德峰面积的RSD分别为0.66%和0.68%。结果表明氯霉素和醋酸曲安奈德至少在4小时内稳定。
2.9 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，分精密添加一定量的氯霉素和醋酸曲安奈德对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量，计算回收率。6次测定的平均回收率分别为99.7%和99.6%，RSD分别为0.67%和0.72%。
2.10 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定复方醋酸曲安奈德软膏中氯霉素和醋酸曲安奈德的含量，结果三批样品的氯霉素和醋酸曲安奈德含量为标示量的99.9%，99.8%；99.7%，99.8%；99.9%，99.8%。
3 讨论
分别考察乙腈-0.05%磷酸二氢钠-0.05%十二烷基硫酸钠-三乙胺-磷酸（20：20：60：0.01：0.01），乙腈-甲醇-水-乙醚（8：22：65：5），乙腈-0.05%磷酸二氢钠-0.05%十二烷基硫酸钠-磷酸（20：30：50：0.01），乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）为流动相，结果以乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）为流动相。
参考文献
[1]路雪艳，庞艳华，李邻峰.曲安奈德益康唑乳膏及糠酸莫米松乳膏对持续性局限性湿疹疗效及安全性的临床观察[J].中华临床医师杂志（电子版），2013（3）.
[2]李卫敏，李洋，郑立红.复方黄连膏与醋酸曲安奈德乳膏合用的临床药剂学探讨[J].北京中医药，2009（12）.
[3]张开发，何春峰，杜华.曲安奈德益康唑乳膏治疗脂溢性皮炎78例临床观察[J].中国医学文摘（皮肤科学），2014（2）.
[4]江美琴.莫匹罗星软膏与曲安奈德益康唑乳膏联合治疗重度新生儿尿布皮炎效果观察[J].中外妇儿健康，2011（7）.
[5]吴美水，陈美霞，林世英.曲安奈德益康唑乳膏治疗重度红臀的疗效观察[J].泰山医学院学报，2012（7）.
关键词：复方醋酸曲安奈德软膏；氯霉素；醋酸曲安奈德
醋酸曲安奈德作用与氢化可的松的相似，抗炎强度为氢化可的松的5-20倍，且抗炎作用和抗过敏作用强、较持久，水钠潴留作用较强[1-5]。氯霉素化学中文名称为D-苏式-（-）-N-[α-（羟基甲基）-β-羟基-对硝基苯乙基]-2，2-二氯乙酰胺。氯霉素（chloramphenicol，chloromycetin）是由委内瑞拉链霉菌产生的抗生素。氯霉素属抑菌性广谱抗生素。氯霉素用于治疗由伤寒杆菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、流感杆菌、布氏杆菌、肺炎球菌等引起的感染。本文采用高校液相测定了复方醋酸曲安奈德软膏中醋酸曲安奈德和氯霉素的含量。
1 仪器与试药
YP1004万分之一电子分析天平（南京麒麟分析仪器有限公司）；SK3300HP功率可调台式超声波清洗器（上海垒固仪器有限公司）；SPCC-420E 国产全自动实验室洗瓶机（东莞市谱标实验器材科技有限公司）；Heraeus Multifuge X1高性能通用台式离心机（赛默飞世尔科技实验室产品）；Barnstead GenPure 超纯水仪（北京五洲东方科技发展有限公司）；LC98II高效液相色谱仪（北京温分分析仪器技术开发有限公司）；依利特ZW230Ⅱ色谱柱温箱（大连依利特分析仪器有限公司）。氯霉素和醋酸曲安奈德对照品由中国药品生物制品检定所提供。乙腈（上海甲美精细化工有限公司）、甲醇（天津市彪仕奇科技发展有限公司）、十二烷基硫酸钠（济南汇丰达化学有限公司）、醋酸钠（衢州瑞尔丰化工有限公司）、磷酸二氢钠（衢州瑞尔丰化工有限公司）、三乙胺（寿光市鲁科化工有限责任公司）、丙酮（天津市彪仕奇科技发展有限公司）、四氢呋喃（天津市彪仕奇科技发展有限公司）、磷酸（寿光市鲁科化工有限责任公司）、乙醚（天津市彪仕奇科技发展有限公司）。
2 含量测定
2.1 色谱条件
依据查阅文献及考查的结果 ，确定色谱条件如下。色谱柱为安捷伦Cl8规格为（4.6mm×250mm，5μm）；流动相为乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）；检测波长为240nm；流速1.0mL·min-1；柱温：30℃。理论板数按醋酸曲安奈德峰计算应不得低于2000。
2.2 供试品溶液的制备
取复方醋酸曲安奈德软膏适量，精密量取，置50mL量瓶中，加流动相适量，超声处理十分钟，放置至室温，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.3 对照品溶液的制备
分别精密称取醋酸曲安奈德和氯霉素对照品5mg、100mg，置10mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。
2.4 标准曲线的制备1mg·mL-1、2mg·mL-1、4mg·mL-1、8mg·mL-1、16mg·mL-1制备浓度为1～16mg·mL-1的氯霉素对照品溶液，制备浓度为0.1mg·mL-1、0.2mg·mL-1、0.4mg·mL-1、0.8mg·mL-1、1.6mg·mL-1的醋酸曲安奈德对照品溶液。分别按氯霉素、醋酸曲安奈德的测定参数继续测定。以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，氯霉素在1～16mg·mL-1范围内呈良好的线性关系；醋酸曲安奈德在0.1～1.6mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.5 精密度试验
依照2.3项下制备对照品溶液，分别精密吸取氯霉素和醋酸曲安奈德对照品溶液重复测定6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD分别为0.71%和0.72%。结果表明，本实验精密度良好。
2.6 重现性试验
分别称取同批复方醋酸曲安奈德软膏样品6份，分别依照2.2项下供试品制备方法制备供试品，按质量标准含量测定项下方法测定含量，并计算样品的RSD值，RSD值为0.66%，0.68%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.7 专属性试验
取白凡士林、单硬脂酸甘油、磷脂酸、丙酮、十二烷基硫酸钠、羟苯乙脂等辅料制成阴性对照样品，照2.2项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在氯霉素与醋酸曲安奈德出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.8 稳定性试验
依照2.3项下供试品制备方法制备供试品溶液，分别在0，2，4小时进样测定，供试品氯霉素和醋酸曲安奈德峰面积的RSD分别为0.66%和0.68%。结果表明氯霉素和醋酸曲安奈德至少在4小时内稳定。
2.9 回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，分精密添加一定量的氯霉素和醋酸曲安奈德对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量，计算回收率。6次测定的平均回收率分别为99.7%和99.6%，RSD分别为0.67%和0.72%。
2.10 样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定复方醋酸曲安奈德软膏中氯霉素和醋酸曲安奈德的含量，结果三批样品的氯霉素和醋酸曲安奈德含量为标示量的99.9%，99.8%；99.7%，99.8%；99.9%，99.8%。
3 讨论
分别考察乙腈-0.05%磷酸二氢钠-0.05%十二烷基硫酸钠-三乙胺-磷酸（20：20：60：0.01：0.01），乙腈-甲醇-水-乙醚（8：22：65：5），乙腈-0.05%磷酸二氢钠-0.05%十二烷基硫酸钠-磷酸（20：30：50：0.01），乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）为流动相，结果以乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-水-乙醚（8：25：65：2）为流动相。
参考文献
[1]路雪艳，庞艳华，李邻峰.曲安奈德益康唑乳膏及糠酸莫米松乳膏对持续性局限性湿疹疗效及安全性的临床观察[J].中华临床医师杂志（电子版），2013（3）.
[2]李卫敏，李洋，郑立红.复方黄连膏与醋酸曲安奈德乳膏合用的临床药剂学探讨[J].北京中医药，2009（12）.
[3]张开发，何春峰，杜华.曲安奈德益康唑乳膏治疗脂溢性皮炎78例临床观察[J].中国医学文摘（皮肤科学），2014（2）.
[4]江美琴.莫匹罗星软膏与曲安奈德益康唑乳膏联合治疗重度新生儿尿布皮炎效果观察[J].中外妇儿健康，2011（7）.
[5]吴美水，陈美霞，林世英.曲安奈德益康唑乳膏治疗重度红臀的疗效观察[J].泰山医学院学报，2012（7）.