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目的
观察顺铂耐药卵巢癌细胞株COC1/DDP中谷胱甘肽转移酶π(GSTπ)基因的表达,探讨其反义寡核苷酸对COC1/DDP顺铂耐药的逆转作用。
方法设计合成针对GSTπ的硫代脱氧寡核苷酸(ASODN),以200 nmol/L浓度转染COC1/DDP细胞,用噻唑蓝法观察顺铂对细胞抑制率的变化,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测基因在mRNA水平表达的改变。
结果(1) COC1/DDP细胞中GSTπ基因呈高表达,其m RNA相对表达值为0.78±0.13。而COC1细胞中无表达。(2)与COC1/DDP细胞组比较,GSTπ-ASODN组GSTπ-m RNA降低,相对表达值为0.058± 0.022,耐药指数(RI)降低为3.61,差异均有统计学意义(P< 0.05);错义寡核苷酸组,GSTπ表达及RI改变差异无统计学意义(P> 0.05)。
结论(1)GSTπ基因高表达与COC1细胞获得顺铂耐药性有密切关系。(2)GST-ASODN能有效逆转COC1/DDP细胞株对顺铂的耐药性。