【摘 要】
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目的观察同种肝移植大鼠转染融合基因人CTLA4-Ig(huCTLA4-Ig)对急性排斥反应的抑制作用.方法供者为BN大鼠,受者为Lew大鼠.将受者分为三组,A组(5只):为空白对照组,供肝冷保存
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目的观察同种肝移植大鼠转染融合基因人CTLA4-Ig(huCTLA4-Ig)对急性排斥反应的抑制作用.方法供者为BN大鼠,受者为Lew大鼠.将受者分为三组,A组(5只):为空白对照组,供肝冷保存时不感染腺病毒;B组(4只):为阴性对照组,供肝冷保存时感染携带报告基因GFP的重组腺病毒;C组(5只):为基因治疗组,供肝冷保存时,先体外后体内感染携带融合基因huCT-LA4-Ig的重组腺病毒;观察该治疗基因在受者体内的表达及其对急性排斥反应的抑制作用.结果(1)A组与B组受者均在3周内死亡,A、B组平均生存时间分别为(16.6±2.5)d和(15.5±3.1)d,C组受者均能获得长期生存(＞150 d);C组与A、B组生存期比较,差异有统计学意义(P＜0.01).(2)移植肝病理学检查发现:术后8 d,A组与B组移植肝均发生严重的细胞性排斥.C组术后8 d,可见移植肝轻、中度的汇管区炎症,但组织损伤程度显著减轻;术后150 d,可发现单核细胞浸润,但胆管保存完好,无血管损伤证据.(3)术前大鼠血清白细胞介素2(IL-2)浓度为(362.09±45.84)ng/L;肝移植术后,A、B组血清IL-2的浓度即升到较高水平(约为术前的1.5～2.5倍),而C组却始终维持在一个较低水平(接近或低于术前水平);术后3、7 d,C组血清IL-2的浓度与A、B组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论建立了简便有效的针对血管化移植物的基因转移系统;系统中重组腺病毒在冷保存时能有效感染供肝,并获得融合基因的分泌性表达.移植肝局部产生的可溶性融合蛋白huCTLA4-Ig,能抑制同种急性排斥反应,在不使用常规免疫抑制剂情况下,获得大鼠同种异体移植肝的长期存活.
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