【摘 要】
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为降低白酒中杂醇油含量,构建高活性杂醇油酯化酶,酯化杂醇油为较高沸点的酯从而降低酒体中杂醇油含量。该研究利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增酯化酶基因,酶切、以其
【机 构】
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湖北工业大学马克思主义学院湖北省非物质文化遗产研究中心
【基金项目】
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湖北省非物质文化遗产研究中心2018年开放基金项目(HGFY20180101,HGFY20180302),湖北省教育厅2018人文社科青年项目(18Q055).
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为降低白酒中杂醇油含量,构建高活性杂醇油酯化酶,酯化杂醇油为较高沸点的酯从而降低酒体中杂醇油含量。该研究利用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增酯化酶基因,酶切、以其为模板,进行易错聚合酶链式反应,连接、转化大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,筛选酶活显著提升的酯化酶。结果表明,酯化酶氨基酸中146位缬氨酸突变为天冬氨酸,198位苏氨酸突变为异亮氨酸,376位天冬氨酸突变为谷氨酸。初始酯化酶和构建酯化酶合成乙酸正丙酯、乙酸异丁酯、乙酸异戊酯酶活分别为10.83 U/L、24.72
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