【摘 要】
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目的观察糖尿病大鼠mTOR和VEGF基因表达与肾损伤间的相关性.方法糖尿病(DM)大鼠成模后12、16、20、24周,选取DM组分别为7、6、6、9只和非糖尿病组(NDM)组各5只,测定肾小球及
【机 构】
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昆明医科大学第四附属医院内分泌科,昆明医科大学第四附属医院病理科,昆明医科大学第四附属医院检验科,
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目的观察糖尿病大鼠mTOR和VEGF基因表达与肾损伤间的相关性.方法糖尿病(DM)大鼠成模后12、16、20、24周,选取DM组分别为7、6、6、9只和非糖尿病组(NDM)组各5只,测定肾小球及肾小管病理改变程度半定量评分(HS)及肾小球基底膜(GBM)厚度;免疫组化(IHC)测定mTOR、VEGF、VEGFR2抗体在肾脏中的表达;实时定量PCR(RT-Q-PCR)荧光染料法检测基因在肾脏的mRNA表达,基因的标化值(SCt)定量PCR产物.结果光镜下HS在总的DM组及各病程DM组均高于同期NDM组,20、24周DM组明显升高,GBM厚度在总的DM组明显高于NDM组,P<0.01,24周DM组增厚更明显;VEGF、VEGFR2基因IHC评分在总的DM组及各病程DM组均高于NDM组,两者在总的DM组中正相关,均与光镜下HS正相关,P<0.05.VEGF、VEGFR2基因SCt值在总的DM组均明显高于NDM组,VEGF基因SCt值在DM组间12周表达最高,24周次之,较16、20周明显升高,P<0.01;VEGFR2基因SCt值在DM组间随病程延长逐渐降低,24周最低.VEGF基因SCt值与VEGFR2基因SCt值在总的DM组明显正相关,P<0.01,与GBM厚度在总的DM组正相关.mTOR基因与VEGF、VEGFR2基因三者的IHC评分在总的DM组中均互相正相关,均与光镜下HS正相关,P<0.05.结论光镜下HS及GBM厚度在DM大鼠中升高,反应肾损伤,VEGF、VEGFR2基因蛋白及mRNA在DM大鼠肾脏中表达,且随着DM病程增长表达协同增高;VEGF mRNA表达与GBM厚度正相关;mTOR基因可能与VEGF、VEGFR2基因蛋白表达在DM大鼠肾损伤有协同相关作用,但不排外不同病程、不同动物样本量表达结果及实验条件可能存在结果差异.
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