【摘 要】
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目的探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）/蛋白激酶B（Akt）/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）通路的影响。方法将小鼠足细胞MPC5分为5组：正常对照组(5.5mmol·L-1葡萄糖)、高糖组(30mmol·L-1葡萄糖)、淫羊藿苷组(30mmol·L-1葡萄糖+5μmol·L-1淫羊藿苷)、GDC-0349组(30mmol·L-1葡萄糖+50μmol
【基金项目】
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河北省医学科学研究课题计划项目（20190871）；
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目的探讨淫羊藿苷对高糖诱导的足细胞自噬、凋亡及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）/蛋白激酶B（Akt）/环磷酸腺苷反应元件结合蛋白（CREB）通路的影响。方法将小鼠足细胞MPC5分为5组：正常对照组(5.5mmol·L-1葡萄糖)、高糖组(30mmol·L-1葡萄糖)、淫羊藿苷组(30mmol·L-1葡萄糖+5μmol·L-1淫羊藿苷)、GDC-0349组(30mmol·L-1葡萄糖+50μmol·L-1GDC-0349)、淫羊藿苷+GDC-0349组(30mmol·L-1葡萄糖+5μmol·L-1淫羊藿苷+50μmol·L-1GDC-0349)。培养48h后，噻唑蓝法检测MPC5细胞活力；吖啶橙染色观察MPC5细胞自噬情况；流式细胞术检测MPC5细胞凋亡；蛋白印迹法检测MPC5细胞自噬[微管相关蛋白1轻链3（LC3）II、LC3I、自噬相关蛋白（Beclin-1）]、凋亡[Bcl-2相关X蛋白（Bax）、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）]和mTOR/Akt/CREB通路相关蛋白的表达。结果与正常对照组比较，高糖组MPC5细胞活力、Bcl-2、磷酸化mTOR（p-mTOR）/mTOR、磷酸化Akt（p-Akt）/Akt、磷酸化CREB（p-CREB）/CREB蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），自噬能力增强，自噬体表现出橙色荧光，细胞凋亡率、LC3II/LC3I、Beclin-1、Bax蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）；与高糖组比较，淫羊藿苷组MPC5细胞活力、LC3II/LC3I、Beclin-1、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-Akt/Akt、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著升高，自噬能力进一步增强，自噬体数量增多，自噬体呈现出砖红色荧光（P＜0.05），细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著降低（P＜0.05），GDC-0349组MPC5细胞活力、LC3II/LC3I、Beclin-1、Bcl-2、p-mTOR/mTOR、p-Akt/Akt、p-CREB/CREB蛋白表达水平显著降低，自噬能力减弱，自噬体数量减少，自噬体表现出橙色荧光（P＜0.05），细胞凋亡率、Bax蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）；淫羊藿苷+GDC-0349可逆转淫羊藿苷对高糖诱导MPC5细胞的作用效果（P＜0.05）。结论淫羊藿苷通过激活mTOR/Akt/CREB通路促进高糖诱导的足细胞自噬抑制细胞凋亡。
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