新型肿瘤标志物人PF4重组表达、活性鉴定及单克隆抗体制备

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目的 构建重组表达质粒pET28a-PF4,诱导表达重组人PF4 (rhPF4),制备rhPF4的单克隆抗体.方法 将pUC-57-PF4质粒中的PF4基因克隆到原核表达质粒pET28a上,在BL21菌株中诱导表达,对表达的蛋白进行亲和层析纯化和SDS-PAGE及western blotting鉴定;MTT法检测rhPF4对对数生长期EA.hy926细胞的生长抑制作用;以rhPF4为免疫原,通过细胞融合技术制备抗rhPF4的单克隆抗体.结果 重组质粒在BL21菌株中高效表达,rhPF4占总蛋白的19%,表
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