【摘 要】
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目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase3)在增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)经光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)诱导的凋亡效应中的作用.方法 将原代培养的HSF分为对照组、HMME-光动力疗法(PDT)组和caspase3抑制剂(Z-DEVD-FMK)组,经caspase3-异硫氰酸荧光素(FTTC)-碘化丙啶(PI)染色后在荧光显微镜下观察各组细胞内caspase3的荧光强度.收集各组细
【机 构】
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100036北京,解放军空军总医院皮肤科,解放军总医院激光医学科,解放军总医院激光医学科,解放军总医院第一附属医院烧伤研究所,解放军总医院第一附属医院烧伤研究所
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目的 探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 (caspase3)在增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)经光敏剂血卟啉单甲醚(HMME)诱导的凋亡效应中的作用.方法 将原代培养的HSF分为对照组、HMME-光动力疗法(PDT)组和caspase3抑制剂(Z-DEVD-FMK)组,经caspase3-异硫氰酸荧光素(FTTC)-碘化丙啶(PI)染色后在荧光显微镜下观察各组细胞内caspase3的荧光强度.收集各组细胞,在活性caspase3-FITC单染后,经流式细胞术检测活性caspase3阳性细胞百分率；在PI单染后,经流式细胞术检测细胞凋亡率.结果 对照组和caspase3抑制剂组HSF胞质中caspase 3-FTTC荧光微弱,PDT组荧光显著增强；对照组活性caspase3阳性细胞百分率低,HMME-PDT组(30.86％±1.21％)上升,caspase3抑制剂组(2.46％±0.18％)降低,后两组间比较,t=21.76,P＜0.05.PI染色分析表明,对照组凋亡率(2.45％±0.22％)低,PDT组(30.54％±3.78％)显著升高,两组比较,t=35.90,P＜0.05；caspase3抑制剂组凋亡率( 10.46％±2.15％)低于PDT组,但显著高于对照组(t=27.97,P＜ 0.05).结论 HMME-PDT诱导HSF发生的凋亡效应与caspase3的激活密切相关,但该凋亡效应并不依赖于caspase3。
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