【摘 要】
：
目的 研究连续传代的犬肾上皮(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞MDCK-siat7e的传代稳定性.方法 复苏工作细胞库,连续传45代,比较不同代次(0、7、17、28、45代)MDCK-siat7e细胞生长4d的形态、0～9d的生长曲线及比生长速率(μ)、葡萄糖比消耗率[Qi(Gluc)24h]、乳酸比生成率[Qi(Lac)24h]、氨比生成率[Qi(NH4+)24h].采用qRT-PCR法检测不同代次MDCK-siat7e细胞中siat7e基因的表达量.采用裸鼠体内接种
【机 构】
：
兰州生物制品研究所有限责任公司中试研究室甘肃省疫苗工程技术研究中心,甘肃兰州730046
论文部分内容阅读
目的 研究连续传代的犬肾上皮(Madin-Darby canine kidney,MDCK)细胞MDCK-siat7e的传代稳定性.方法 复苏工作细胞库,连续传45代,比较不同代次(0、7、17、28、45代)MDCK-siat7e细胞生长4d的形态、0～9d的生长曲线及比生长速率(μ)、葡萄糖比消耗率[Qi(Gluc)24h]、乳酸比生成率[Qi(Lac)24h]、氨比生成率[Qi(NH4+)24h].采用qRT-PCR法检测不同代次MDCK-siat7e细胞中siat7e基因的表达量.采用裸鼠体内接种法检测连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞的成瘤性;采用细胞裂解物裸鼠体内接种法和细胞DNA裸鼠体内接种法检测连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞的致瘤性.结果 5个不同代次的MDCK-siat7e细胞在培养4d时均呈圆形,细胞边缘清晰,均匀分散于培养液中,无聚团现象,呈悬浮生长状态,生长状态良好.不同代次MDCK-siat7e细胞的μ、Qi(Gluc)24h、Qi(Lac)24 h及Qi(NH4+)24h差异均无统计学意义(P＞0.05).不同代次MDCK-siat7e细胞siat7e基因表达量差异均无统计学意义(P＞0.05).连续传代至第45代的MDCK-siat7e细胞无明显的致瘤性.结论 MDCK-siat7e细胞连续传代至45代时,细胞形态基本保持一致,目的 基因稳定,无致瘤性.
其他文献
沙障在固定流沙、促进植被恢复和改良土壤等生态建设方面起着重要作用。对毛乌素沙地设置沙柳(Salix psammophila)沙障6、8、10、11、12年的沙丘迎风坡(裸露沙丘地作为对照)开展了植被调查和土壤养分测试分析。结果显示:设障8年后的沙丘迎风坡0—30 cm深度内的土壤有机质、全氮含量显著(P<0.05)高于流动沙丘,且设障10—11年沙丘迎风坡植被盖度、0—80 cm深度内土壤有机质和
为探究西北干旱区内陆河流域水生态系统时空演变规律,2017年7月对黑河甘肃段进行了浮游植物的采样调查,并收集1981、1997、2008年浮游植物夏季调查数据,分析黑河上中下游浮游植物物种、生物多样性和优势种等群落结构的演变特征,同时提出生物活动力指标以表征河流生物的活动能力和活跃程度。结果表明:在空间分布上,黑河中游在各年份都具有最为丰富稳定的浮游植物群落结构,物种数(61属)、生物多样性指数(
目的 建立疫苗中铝含量的紫外分光光度测定法,并进行验证.方法 采用Tiron试剂衍生氯化铝,紫外分光光度法进行检测,筛选方法的最佳检测波长,并绘制标准曲线.同时采用氢氧化铝标准溶液优化样品处理方法中的干烤温度(120、140、160、180、200、220℃)及1 mol/L盐酸加入量(10、20、50、100、200、300、400和500 μL).对建立的方法进行准确性、精密性及专属性验证.应用建立方法检测含铝佐剂疫苗中铝含量,并与传统滴定法进行比较.结果 确定衍生物的检测波长为310 nm.氯化铝标