感染性猪圆环病毒2型基因组DNA的分子克隆

来源 :中国病毒学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ZHAOTAON

【摘要】

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本研究通过PCR扩增出猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组(1 768bp),克隆入pcDNA3载体的EcoRI酶切应点,获得含有PCV-2全基因组的重组质粒,命名为pcDNApcv2.将重组质粒大量扩增后,

【作者】

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芦银华华修国崔立谈国蕾许立华黄伟坚陈德胜陈溥言

【机构】

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南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,上海交通大学农学院,南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

【出处】

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中国病毒学

【发表日期】

：

2003年4期

【关键词】

：

猪圆环病毒2型基因组 DNA 克隆 Porcine circovirus type 2 Complete genome Transfection

【基金项目】

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国家高技术研究发展计划(863计划)，上海市科技兴农科技攻关项目

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本研究通过PCR扩增出猪圆环病毒2型(PCV-2)的全基因组(1 768bp),克隆入pcDNA3载体的EcoRI酶切应点,获得含有PCV-2全基因组的重组质粒,命名为pcDNApcv2.将重组质粒大量扩增后,用EcoRI切出1 768bp的PCV-2全基因组,在体外用T4 DNA连接酶使其连接环化.用脂质体法将体外连接产物转染无PCV污染的PK-15细胞,经4次连续传代,用间接免疫荧光实验(IFA)及电镜观察证实已获得复制能力的PCV-2病毒.由此可见,本试验构建的环化的PCV-2全基因组DNA具有感染

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