小鼠CTLA4-Ig融合蛋白的表达、纯化及活性测定

来源 :山东大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户：ywqiang

【摘要】

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目的:在真核细胞中表达CTLA4-Ig融合蛋白,获得纯品并测定其生物学活性.方法:用电转染的方法将真核表达载体pREP7-CTLA4-IgG2c转染SP2/0细胞,经300μg/ml的潮霉素筛选得到阳性

【作者】

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张蘋张利宁刘军莉王群宋静王晓燕

【机构】

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山东大学医学院免疫学研究所

【出处】

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山东大学学报(医学版)

【发表日期】

：

2004年4期

【关键词】

：

CTLA4 融合蛋白混合淋巴细胞培养增殖基因表达 Cytotoxic T lymphocyte antigen-4 Fusion protein Mixe

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目的:在真核细胞中表达CTLA4-Ig融合蛋白,获得纯品并测定其生物学活性.方法:用电转染的方法将真核表达载体pREP7-CTLA4-IgG2c转染SP2/0细胞,经300μg/ml的潮霉素筛选得到阳性克隆;大量培养后收集合有重组CTLA4-IgG2c的细胞培养上清,用rProteinA亲和层析柱纯化CTLA4-Ig.用还原和非还原性SDS-PAGE和蛋白印迹进行鉴定.采用单向混合淋巴细胞培养(3H掺入法)测定CT-LA4-Ig对T细胞增殖的抑制效应.结果:阳性克隆大量培养的细胞上清经rPrtotein

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