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采用杂交瘤技术，用纯化的鹅细小病毒（Gooseparvovirus，GPV）VP3蛋白免疫Balb／c小鼠制备单克隆抗体（mAb），经间接ELISA方法筛选和有限稀释法进行3次亚克隆后获得一株抗鹅细小病毒VP3蛋白杂交瘤细胞株（4E5）。经鉴定，该mAb为IgGl亚型，轻链为K链。Westernblot试验结果表明，获得的4E5mAb可特异性地识别鹅细小病毒VP3蛋白。本试验成功制备了抗鹅细小病毒VP3蛋白单克隆抗体，为研究鹅细小病毒病诊断方法奠定了基础。