人促血管生成素-2基因真核表达载体的构建及测序分析

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目的克隆促血管生成素-2(Ang-2)基因,构建携带Ang-2基因的真核表达质粒pcDNA3.1-HA2-Ang-2,鉴定并分析其基因序列.方法从人胎盘组织中提取组织总RNA,用RT-PCR方法扩增出Ang-2基因的全长cDNA,并克隆于含有HA2-标签(tag)的真核表达载体pcDNA3.1上,酶切鉴定,质粒双向测序鉴定克隆的Ang-2基因.结果扩增出人Ang-2基因的全长cDNA,电泳结果显示扩增的Ang-2 cDNA大小约1.5kb,双酶切鉴定和DNA双向测序证实获得正确的重组质粒pcDNA3.1-HA2-Ang-2.结论正确克隆Ang-2基因,成功构建其真核表达质粒pcDNA3.1-HA2-Ang-2,为进一步深入研究人的肿瘤血管生成机制及抗肿瘤血管生成治疗奠定了坚实的基础.
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