消退素D1对转化生长因子β诱导的大鼠肺成纤维细胞纤维化增殖及胶原蛋白合成的抑制作用

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目的 探讨消退素D1对转化生长因子β(TGF-β)诱导的大鼠原代肺成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成以及向肌纤维母细胞转化的影响.方法 分离和培养大鼠原代肺成纤维细胞,用TGF-β(10 μg/L)干预建立成纤维细胞体外纤维化增殖模型,分别应用不同浓度(0、10、25、100μmol/L)消退素D1作用于经TGF-β诱导的肺成纤维细胞.采用BrdU细胞增殖试剂盒测定细胞增殖;采用实时定量聚合酶链反应测定mRNA表达;同时应用蛋白质印迹法检测肺成纤维细胞胶原蛋白和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白表达.结果 消退素D1能够抑制TGF-β诱导的肺成纤维细胞增殖且呈剂量依赖性,与TGF-β组[(156.0±13.6)%]相比,TGF-β+消退素D1 10 μmol/L组[(130.0±4.6)%]、TGF-β+消退素D1 25μmol/L组[(118.0±5.2)%]、TGF-β+消退素D1 100 μmol/L组[(99.0±12.6)%]细胞增殖均明显受到抑制(均P<0.01).该抑制作用依赖于磷脂酰肌醇-3-激酶和消退素受体.消退素D1能够明显抑制TGF-β诱导的肺成纤维细胞的胶原蛋白合成及α-SMA表达(均P<0.01).结论 消退素D1抑制TGF-β诱导的大鼠肺成纤维细胞增殖、胶原蛋白合成以及向肌纤维母细胞转化标记的表达.
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