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为建立新生牛雄性生殖干细胞的体外增殖与分化体系，将新生牛睾丸消化成单细胞悬液，分别进行差速贴壁、不连续密度梯度Percoll分选雄性生殖干细胞和支持细胞，对分选生殖干细胞进行体外培养。结果表明，差速贴壁法能有效分选雄性生殖干细胞与支持细胞，2％血清浓度的培养液即可用于雄性生殖干细胞的体外培养，添加100ng·mL-1的GDNF能显著促进雄性生殖干细胞的增殖，增殖形成的雄性生殖干细胞集落具有一定多能性。