【摘 要】
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目的 研究类固醇生成因子-1(SF-1)基因下调对人肾上腺皮质腺癌H295R细胞的影响,并探讨SF-1在肾上腺肿瘤发病中的作用. 方法 用含SF-1特异性短发夹(shRNA)序列的质粒载体pGene
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科,解放军总医院分泌科,解放军总医院泌尿外科
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目的 研究类固醇生成因子-1(SF-1)基因下调对人肾上腺皮质腺癌H295R细胞的影响,并探讨SF-1在肾上腺肿瘤发病中的作用. 方法 用含SF-1特异性短发夹(shRNA)序列的质粒载体pGenesil1-SF-1-shRNA及含非特异性序列的阴性对照质粒pGenesil1-negative-shRNA分别转染H295R细胞.48 h后用蛋白质印迹法和荧光定量PCR检测SF-1表达水平.WST-1法及细胞计数法检测转染后细胞增殖情况,免疫组化SABC法检测转染后各细胞组中Ki-67表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况. 结果 SF-1-shRNA有效地抑制了SF-1的表达,在蛋白水平和mRNA水平的抑制率分别为69.07%和71.02%(P＜0.01).WST-1及细胞计数法均显示SF-1基因沉默组细胞增殖缓慢,增殖明显受到抑制(P＜0.01);而TUNEL结果 恰好相反,荧光镜下SF-1基因沉默组凋亡细胞的数目及形态均比较明显,凋亡细胞数约为阴性对照组的3.7倍(P＜0.01);SF-1基因干扰后,其Ki-67阳性细胞率要低于阴性对照组细胞,分别为(16.90±2.17)%和(33.48±3.16)%(P＜0.01). 结论 SF-1基因沉默可抑制肾上腺皮质腺癌细胞增殖,有望成为研究肾上腺肿瘤发病机制及其治疗的重要分子.
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