目的建立一种高效液相色谱法同时测定四物汤中5-羟甲基糠醛、川芎嗪、芍药苷、阿魏酸四种活性成分的含量。方法采用Phenomenex luna C18（250mm×4.6mm,5.0μm）色谱柱,流动相:乙腈（A）-0.05%甲酸水溶液（B）,线性梯度洗脱（0⁵min,A相5%;5¹0min,A相5%→10%;10²0min,A相10%→20%;20⁴0min,A相20%→30%;40→46min,A相30%→5%）;流速:1.0mL·min^-1;检测波长:230nm和282nm。柱温:35℃。结果 5-羟甲基糠醛、川芎嗪、芍药苷、阿魏酸分别在0.0215⁰.43mg·mL^-1、0.021⁰.42mg·mL^-1、0.0195⁰.39mg·mL^-1、0.023⁰.46mg·mL^-1范围内呈良好线性关系。四物汤中5-羟甲基糠醛、川芎嗪、芍药苷、阿魏酸四种有效成分的含量分别为0.0681%、未检出、0.250%、0.0358%。结论该方法操作简便,结果准确可靠。