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采用两步PCR法成功地克隆了一个全长的cDNA.首先,用差式分析法克隆得到差别表达的cDNA片段,再分别用这些片段内部的特异序列及cDNA两端不同接头的序列为引物进行第一步PCR扩增,得到差别cDNA片段的上游和下游序列.然后,根据第一步PCR扩增得到的上游和下游序列设计基因特异的引物进行第二步PCR,从而得到全长的cDNA.