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提取SD大鼠肝组织总RNA，通过RT-PCR扩增TIMP-1 cDNA片段．将扩增产物克隆至pUCm—T载体上，PCR、限制性酶切及测序证实后，EcoRⅠ和NotⅠ双酶切pUCm—T-TIMP-1重组体，回收TIMP-1，再将其亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中，并将阳性克隆进行PCR、酶切和测序分析，构建pPIC9K—TIMP-1表达载体，电击转化到毕赤酵母，通过表型筛选和诱导表达得到蛋白表达工程菌，为进一步研究TIMP-1功能和作用机理等的研究创造了条件．