三叶崖爬藤ISSR反应体系的初探

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对三叶崖爬藤ISSR-PCR扩增反应体系的建立和优化进行探讨。结果表明,最适宜的PCR反应条件为20μLPCR反应体积中含有1×缓冲液,20 ng模板DNA,3.0 mmol/L MgCl2,0.2 mmol/L dNTPs,1.5 U Taq DNA聚合酶,0.5μmol/L引物。扩增程序为:94℃预变性5 min;再35个循环:94℃60 s,52℃60 s和72℃105 s;最后72℃延伸10 min。
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