【摘 要】
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为了研究虾青素对睾丸生殖细胞瘤细胞株NCCIT和NT2细胞凋亡、自噬的影响及可能的作用机制,用梯度浓度的虾青素对NCCIT和NT2细胞进行处理后,采用MTT实验、台盼蓝拒染法和细胞克隆实验检测各组细胞的增殖速率;采用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Hoechst33258荧光染色法观察各组细胞的形态变化;采用Western-blot法检测细胞凋亡相关蛋白质（B
【机 构】
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湖南师范大学生命科学学院省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室
【基金项目】
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省部共建淡水鱼类发育生物学国家重点实验室2018年度开放课题基金资助项目； 湖南师范大学“克氏原螯虾生态繁养”产学研合作示范基地资助项目；
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为了研究虾青素对睾丸生殖细胞瘤细胞株NCCIT和NT2细胞凋亡、自噬的影响及可能的作用机制,用梯度浓度的虾青素对NCCIT和NT2细胞进行处理后,采用MTT实验、台盼蓝拒染法和细胞克隆实验检测各组细胞的增殖速率;采用Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Hoechst33258荧光染色法观察各组细胞的形态变化;采用Western-blot法检测细胞凋亡相关蛋白质（Bcl-2、Bax、caspase-3、PARP）、自噬蛋白（Beclin1、LC3）的表达水平,以及MAPK信号通路蛋白质细胞外信号调控的激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK）、c-Jun氨基端激酶（c-Jun N-terminal kinase, JNK）、p38的表达及磷酸化水平。结果显示,与空白对照组比较,虾青素处理组中NCCIT和NT2细胞的增殖速率明显降低,细胞凋亡率增加（P<0.05）,细胞出现体积变小、细胞核荧光强度增高、核固缩等凋亡特征,同时,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调,促凋亡蛋白Bax、自噬蛋白Beclin1和LC3Ⅱ表达上调。此外,虾青素可剂量依赖性地增加ERK、JNK、p38的磷酸化水平。以上结果表明,虾青素可抑制睾丸生殖细胞瘤细胞系（NCCIT/NT2）生长,诱导细胞凋亡和自噬,其机制可能与虾青素激活MAPK信号通路有关。
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