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目的研究克隆并表达结核分支杆菌H37Rv结构基因icl的最佳策略,并获得纯化蛋白.方法以M.tb H37Rv基因组为模板,扩增该菌株的异柠檬酸酶基因icl,并重组入pUC18质粒进行克隆,克隆基因进而重组入原核表达质粒pET28-a(+)中,在不同的条件下进行诱导表达.重组蛋白以Ni-NTA agarose亲和层析柱纯化.结果在25℃,0.25mM IPTG诱导表达8h可获得最佳表达量的可溶性重组蛋白,经HPLC和质谱检测分子质量为目标蛋白.结论本研究中所采用的icl基因克隆表达策略能够获得正确的高表达的