氢气对内皮-单核细胞黏附及内皮通透性的调节作用

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目的

观察富氢液对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)与单核细胞的黏附及对血管内皮通透性的调节。

方法

内皮细胞接种于6孔板,数字表随机分为4组(n=42):正常对照组(A组)、富氢液组(B组)、LPS组(C组)和LPS+富氢液组(D组),B、D组为饱和含氢培养液。待内皮细胞融合成单层后的6、12和24 h,分别加入单核细胞共培养90 min,瑞姬氏染色观察细胞黏附情况,酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞上清液血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)和E-选择素的浓度,蛋白印迹法检测血管内皮钙黏连蛋白(VE-cadherin)的表达,免疫荧光法检测24 h时VEcadherin的分布。

结果

与A组比,C组单核-内皮细胞黏附增多(P<0.05),E-选择素和VCAM-1浓度显著升高(P<0.05),VE-cadherin表达量明显减少(P<0.05);相比C组,D组细胞黏附减少(P<0.05),VCAM-1和E-选择素的水平下降(P<0.05),VE-cadherin表达量增加(P<0.05),3个时间点变化趋势相同。24 h荧光结果显示,与A组比,C组VE-cadherin在细胞连接处不完整;与C组比,D组VE-cadherin在细胞连接处较均匀完整。

结论

富氢液可减少LPS诱导的黏附分子释放,抑制单核-内皮细胞黏附,并影响VE-cadherin的表达和分布,参与调节血管内皮通透性。

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