目的 建立不定型流感嗜血杆菌(NTHi)外膜蛋白P6原核表达系统并表达纯化P6,探索其在不同年龄儿童血清中的抗体水平.方法 采用PCR扩增NTHi ATCC49247的P6基因pal,构建NTHi P6原核表达系统,采用亲和层析法纯化NTHi P6.血清P6抗体检测采用ELISA法,检测对象为2013年10～12月到杭州师范大学附属医院体检的儿童228例.组间抗体水平比较采用非参数检验.结果 本研究所构建的原核表达系统能有效表达重组P6蛋白,该重组蛋白有可溶性形式存在,但包涵体较多.ELISA结果显示,＜1岁组P6抗体水平较低,中位数为9 904 ELISA单位,1～3岁组则最高,中位数12 731ELISA单位,两者差异有统计学意义(Z=2.111,P=0.035); 1～3岁组血清P6抗体水平显著高于4～6岁组(中位数10 237 ELISA单位,Z=2.015,P=0.044),后者又显著高于7～14岁组(中位数7 207ELISA单位,Z=3.546,P＜0.01).结论 本研究构建的原核表达系统能表达可溶性重组P6,1～3岁儿童血清中P6抗体水平最高,可能与该年龄段NTHi感染率高有一定关系.