不定型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的表达纯化及其在儿童血清中的抗体水平检测

来源 :中国预防医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:terrychang2009
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目的 建立不定型流感嗜血杆菌(NTHi)外膜蛋白P6原核表达系统并表达纯化P6,探索其在不同年龄儿童血清中的抗体水平.方法 采用PCR扩增NTHi ATCC49247的P6基因pal,构建NTHi P6原核表达系统,采用亲和层析法纯化NTHi P6.血清P6抗体检测采用ELISA法,检测对象为2013年10~12月到杭州师范大学附属医院体检的儿童228例.组间抗体水平比较采用非参数检验.结果 本研究所构建的原核表达系统能有效表达重组P6蛋白,该重组蛋白有可溶性形式存在,但包涵体较多.ELISA结果显示,<1岁组P6抗体水平较低,中位数为9 904 ELISA单位,1~3岁组则最高,中位数12 731ELISA单位,两者差异有统计学意义(Z=2.111,P=0.035); 1~3岁组血清P6抗体水平显著高于4~6岁组(中位数10 237 ELISA单位,Z=2.015,P=0.044),后者又显著高于7~14岁组(中位数7 207ELISA单位,Z=3.546,P<0.01).结论 本研究构建的原核表达系统能表达可溶性重组P6,1~3岁儿童血清中P6抗体水平最高,可能与该年龄段NTHi感染率高有一定关系.
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