目的　构建携带人酪氨酸羟化酶 (tyrosinehydroxylase, TH)目的基因片段的真核表达重组质粒—pcDNA3. 1his hTH,与pEGFP- C2共转染恒河猴骨髓源神经干细胞,观察hTH基因在骨髓源神经干细胞中的表达情况。方法　应用基因重组技术,将pWAV2-TH中TH基因亚克隆到pcDNA3 .1his真核表达载体,以酶切和测序方法鉴定重组质粒pcDNA3 .1his- hTH的正确性;将pcDNA3. 1his hTH和pEGFP- C2经电击穿孔法共转染恒河猴骨髓源神经干细胞, 24h后观察EGFP瞬时表达情况, 10d后进行hTH基因RT PCR,以及hTH和 6His单克隆抗体的免疫组化检测。结果⑴酶切和测序结果均证实pcDNA3 .1his hTH的正确性;⑵细胞转染 24h后,荧光显微镜下可观察到EGFP的表达, 80%以上细胞发出绿色荧光; 10d后RT PCR检测到细胞内有hTH基因的表达,免疫组化结果显示细胞有hTH和 6His抗原表达。结论　成功构建的pcDNA3 .1his -hTH和pEGFP- C2能够共转染恒河猴骨髓源神经干细胞,hTH、EGFP和 6His基因在细胞内有效表达。该系统可以作为体外检测转染率、细胞移植治疗帕金森病活体跟踪移植细胞的技术平台。