【摘 要】
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目的:观察柳氮磺吡啶(sulfasalazine)对乳腺癌ZR-75-1细胞铁死亡(ferroptosis)的激活,并探讨其可能的机制。方法:采用不同浓度的柳氮磺吡啶(0、0.5、1.0和2.0 mmol/L)处理乳
【机 构】
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重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科;
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:81772979)~~
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目的:观察柳氮磺吡啶(sulfasalazine)对乳腺癌ZR-75-1细胞铁死亡(ferroptosis)的激活,并探讨其可能的机制。方法:采用不同浓度的柳氮磺吡啶(0、0.5、1.0和2.0 mmol/L)处理乳腺癌ZR-75-1细胞。随后,在光学显微镜下观察细胞形态的变化;CCK-8法检测细胞的增殖抑制率;蛋白质印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)及胱氨酸-谷氨酸反向转运体亚基xCT蛋白的表达水平;采用荧光探针标记不同浓度柳氮磺吡啶处理后的ZR-75-1细胞,通过流式细胞仪检测细胞内的荧光强度以监测活性氧(reactive oxygen specie,ROS)含量的变化;实时荧光定量PCR法检测二价金属离子转运体1(divalent metal transporter 1,DMT1)mRNA的表达水平。结果 :柳氮磺吡啶可引起ZR-75-1细胞形态学变化和死亡。低浓度柳氮磺吡啶对ZR-75-1细胞增殖的影响不大(P> 0.05),中浓度和高浓度组的柳氮磺吡啶对细胞增殖有明显的抑制作用(P值均<0.05)。较高浓度的柳氮磺吡啶可以抑制细胞内GPX4和xCT蛋白的表达水平(P值均<0.05),也可以促进ZR-75-1细胞内ROS的累积(P值均<0.05)。柳氮磺吡啶能提高ZR-75-1细胞内DMT1 mRNA的表达水平(P <0.05)。结论 :柳氮磺吡啶通过抑制xCT和GPX4蛋白表达使ZR-75-1细胞中ROS大量累积,细胞发生铁死亡,DMT1的激活可能是其机制之一。
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