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背景:目前关于脐带源性干细胞的研究主要是针对其多向分化、组织修复方面,而对脐带干细胞的同种异体之间移植免疫学的报道较少。目的:观察体外培养的人脐带间充质干细胞生物学特性、成骨分化潜能及移植免疫学特征。设计、时间及地点:细胞学体外实验,于2008-11在吉林大学药学院病理学实验室完成。材料:脐带来源于健康产妇足月剖腹产的胎儿,靠近胎儿侧5cm,均征得孕妇同意。方法:应用组织块贴壁法分离培养脐带间充质干细胞,胰酶消化传代。取传至第5代细胞,加入含地塞米松、抗坏血酸、β-甘油磷酸钠的α-MEM完全培养基进行成骨诱导。另取传至第5代细胞,分别进行正常培养及应用γ-干扰素刺激48h。主要观察指标:脐带间充质干细胞形态观察、生长曲线分析、免疫表型分析。碱性磷酸酶染色观察细胞成骨分化情况。流式细胞仪检测γ-干扰素刺激后细胞免疫表型变化。结果:培养7d倒置显微镜下可见组织块边缘出现呈长梭形、多角形或三角形的贴壁细胞,且随时间延长组织块周围细胞数量逐渐增多。第2,5,9代细胞之间的生长曲线无明显变化,培养20代内未见细胞衰老及增殖速度减慢等现象发生。第2代贴壁细胞CD44,CD105均呈阳性表达,CD34,CD45均呈阴性表达。成骨诱导14d后,碱性磷酸酶染色可见胞核染成均一的淡蓝色。第5代脐带间充质干细胞HLA-ABC呈弱阳性(40.50%),HLA-DR,CD80,CD86呈阴性表达;γ-干扰素刺激48h后,HLA-ABC阳性率增加至87.44%,HLA-DR,CD80,CD86仍呈阴性表达。结论:人脐带间充质干细胞体外诱导成骨能力确切,具有类似骨髓间充质干细胞的特异性表面标记,且具有同种异体移植的低免疫原性。