制备结构稳定,良好的骨诱导性与生物相容性的部分间质血管(SVF)-脱细胞骨基质(ABECM)-壳聚糖(CS)复合支架,观察SVF-ABECM-CS支架对促进兔桡骨骨折愈合的疗效。
方法用Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)的脱细胞方法对猪股骨进行脱细胞处理,应用溶液共混、冷冻干燥法制备ABECM-CS复合支架。对SVF-ABECM-CS支架进行定性分析,观察SVF-ABECM-CS复合多孔支架的形态学、孔隙率、力学性能和细胞-支架复合培养的相容性。选用成年健康的新西兰大白兔12只,沿兔前臂桡侧暴露桡骨干并锯断留有0.3 cm的骨折间隙造成骨折模型。在每只大白兔的右侧桡骨骨折间隙处植入制备好的SVF-ABECM-CS复合支架,其左侧为空白对照组。通过X线片、生物力学检测及组织形态学检测等方法对兔桡骨骨折模型两侧桡骨的骨折愈合进行比较。
结果ABECM材料苏木素-伊红(HE)染色、Hoechest33258荧光染色均无细胞残留,茜素红染色、Ⅰ型胶原免疫组织化学染色、骨形态发生蛋白-2抗体染色阳性。扫描电镜显示支架具有多孔结构,孔径50~200 μm,孔隙率为(53.50±4.23)%,力学测试支架干燥状态纵向压缩模量为(33.23±14.45) mPa,支架湿润状态下的压缩模量为(2.27±1.13) mPa。细胞-支架复合培养相容性良好。术后第4周和第12周实验组通过X线片反映出的骨愈合结果明显强于对照组;术后第12周生物力学检测实验组中最大负荷、抗弯曲强度下载荷/位移等参数与对照组比较差异均有统计学意义(t=7.418、5.131、2.838,P=0.004、0.009、0.027)。而弹性模量实验组与对照组比较提高了13.59%,差异无统计学意义(t=1.455,P=0.064);术后第12周,组织形态学结果显示,实验组成骨及塑形等方面明显优于对照组。
结论制备的ABECM-CS复合多孔支架去细胞彻底,保留了脱细胞骨基质主要成分,具备合适的孔径和孔隙率,细胞相容性良好。SVF-ABECM-CS复合支架可有效促进兔桡骨骨折的愈合。