【摘 要】
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目的构建抑制血管内皮生长因子（VEGF）活性的小干扰RNA表达载体。方法构建含有PolⅢH1启动子的pSUPER-H1质粒，化学合成3对编码短发夹RNA的寡核苷酸序列，各64个碱基，退火、克隆到经B
【机 构】
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苏州大学附属第一医院,上海交通大学附属第六人民医院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30371459）,上海市科学技术发展基金资助（034047）
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目的构建抑制血管内皮生长因子（VEGF）活性的小干扰RNA表达载体。方法构建含有PolⅢH1启动子的pSUPER-H1质粒，化学合成3对编码短发夹RNA的寡核苷酸序列，各64个碱基，退火、克隆到经BglⅢ、HindⅢ酶切处理的pSUPER-H1质粒PolⅢH1启动子下游，获得重组pSUPER-H1-VEGF质粒，转化感受态大肠杆菌，挑选阳性克隆，抽取重组质粒，EcoRⅠ、HindⅢ双酶切电泳、测序鉴定。结果重组质粒经EcoRⅢ、HindⅢ双酶切琼脂糖凝胶电泳分析，表明64个碱基的核苷酸序列成功插入到预计位
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