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目的
探讨外泌体miR-218-5p在结直肠癌(CRC)患者血清中的表达水平及其与患者临床病理特征的相关性,评价其在CRC中的诊断效能。
方法选择同济大学附属同济医院2016年10月至2018年10月确诊的结直肠癌病例组78例,术前采血并保存血清;选择同期健康体检者40例作为对照组。采用ExoQuick试剂盒提取血清外泌体,应用透射电镜、NTA、蛋白印迹对外泌体进行形态学和分子表型鉴定;利用miRNeasy试剂盒提取血清外泌体中总RNA,实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测各组血清外泌体miR-218-5p的表达水平。以miR-218-5p相对表达水平的中位数为截断值,将CRC患者分为高表达与低表达组,用χ²检验判断其与临床病理特征的关系;受试者工作特征(ROC)曲线判断其在结直肠癌中的诊断效能。
结果试剂盒法成功提取到血清中的外泌体。结直肠癌组血清外泌体miR-218-5p的表达水平明显低于对照组[0.566(0.364,0.850)比1.054(0.781,1.709),P<0.001];其低表达程度与肿瘤大小、TNM分期、肿瘤淋巴结转移和浸润深度显著相关(P均<0.05);ROC分析表明血清外泌体miR-218-5p诊断结直肠癌的曲线下面积(AUC)为0.827(95%CI 0.754~0.900),明显优于常规的肿瘤标志物癌胚抗原CEA(AUC=0.718,95%CI 0.626~0.811)和糖类抗原CA199(AUC=0.661,95%CI 0.564~0.758)。
结论结直肠癌患者血清外泌体中 miR-218-5p的表达下调与多个不良临床病理学因素相关,具有成为结直肠癌诊断生物标志物的潜力。