【摘 要】
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目的构建幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A(HspA)亚单位核酸疫苗,为进一步研制Hp核酸多价疫苗提供技术平台。方法以PMD-HspA为模板,扩增、纯化Hp hspA基因,插入到真核表达载体PcDNA3中,
【机 构】
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新乡医学院医学检验系,新乡医学院第一附属医院检验科,新乡医学院第三附属医院检验科
【基金项目】
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河南省科技攻关计划项目(102102310154), 河南省高校科技创新人才项目(2012HASTIT024), 河南省高校青年教师骨干项目(2010GGJS-117), 河南省教育厅科学技术研究重点项目(12A320017)
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目的构建幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白A(HspA)亚单位核酸疫苗,为进一步研制Hp核酸多价疫苗提供技术平台。方法以PMD-HspA为模板,扩增、纯化Hp hspA基因,插入到真核表达载体PcDNA3中,转化大肠埃希菌DH5a,经氨苄西林抗性筛选阳性克隆,得到重组核酸疫苗pcDNA3-HspA,用特异性PCR方法和小提质粒酶切电泳鉴定重组质粒,同时将pcDNA3-HspA进行测序,进一步确定是否构建成功及鉴定构建过程中是否发生基因突变。结果 PCR鉴定结果显示,扩增产物为0.36kb的目的基因;酶切鉴定结果
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