松果菊苷对结肠癌SW480细胞体内外增殖、侵袭和转移的影响

来源 :广州中医药大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:littlebone
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【目的】探讨松果菊苷对结肠癌细胞体内外增殖、侵袭和转移的影响及机制。【方法】(1)体外实验:以松果菊苷0(作为空白对照)、10、25、50μmol/L处理结肠癌SW480细胞24 h后,采用克隆形成实验、BrdU染色法测定细胞增殖能力;流式细胞术测定细胞凋亡率;Transwell实验测定细胞侵袭能力;划痕实验测定细胞迁移能力。(2)体内实验:将60只BALB/c裸鼠随机分为空白对照组,松果菊苷10、25、50 mg/kg组,每组15只。给予所有裸鼠背部皮下注射人结肠癌SW480细胞悬液构建结肠癌移植瘤模型。同时,松果菊苷10、25、50 mg/kg组裸鼠分别腹腔注射相应浓度的松果菊苷溶液,空白对照组裸鼠腹腔注射等量生理盐水,每天1次,连续注射28 d。记录裸鼠存活情况和移植瘤体积。给药结束后,免疫组织化学法测定移植瘤中Ki67、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达水平;原位末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)标记(TUNEL)法测定移植瘤中肿瘤细胞的凋亡水平;蛋白质免疫印迹(Western Blot)法测定移植瘤中E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达水平。【结果】与空白对照组比较,松果菊苷10、25、50μmol/L组细胞克隆数量、BrdU阳性细胞百分比均降低,细胞凋亡率均增加,侵袭细胞数目和划痕闭合率均降低,呈剂量依赖性,松果菊苷25、50μmol/L组差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。与空白对照组比较,松果菊苷10、25、50 mg/kg组裸鼠存活率均增加,移植瘤体积均减小,移植瘤细胞凋亡率均增加,移植瘤中VEGF、Ki67、N-cadherin、Vimentin表达水平均降低,E-cadherin、cl-caspase-3和cl-caspase-9表达水平均升高(P <0.05或P <0.01),呈剂量依赖性,松果菊苷25、50 mg/kg组差异有统计学意义(P <0.05或P <0.01)。【结论】松果菊苷可抑制人结肠癌细胞体内外增殖、侵袭和转移,促进移植瘤裸鼠存活,其机制与促进结肠癌细胞凋亡,调控上皮间充质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达有关。
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