【摘 要】
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目的原核表达鸭坦布苏病毒(DTMUV)非结构蛋白1(NS1)蛋白,并制备小鼠抗NS1多克隆抗体。方法利用PCR从DTMUV AH-F10株c DNA中获得NS1基因,亚克隆至p ET-32a中进行原核表达,对表
【机 构】
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安徽农业大学动物科技学院; 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室;
【基金项目】
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国家重点研发计划科研专项(2016YFD0500805);兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室专项(SYZD2017002)
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目的原核表达鸭坦布苏病毒(DTMUV)非结构蛋白1(NS1)蛋白,并制备小鼠抗NS1多克隆抗体。方法利用PCR从DTMUV AH-F10株c DNA中获得NS1基因,亚克隆至p ET-32a中进行原核表达,对表达产物进行鉴定。使用含尿素的Tris缓冲液洗去杂蛋白再梯度复性,纯化重组蛋白,并免疫小鼠制备小鼠抗NS1多克隆抗体,琼脂扩散试验测定抗体效价,Western blot法鉴定该抗体的特异性与反应原性,将抗体应用于病毒的间接免疫荧光法(IFA)检测。结果获得鼠抗NS1蛋白多克隆抗体,效价达到1∶8;Western blot结果表明该多抗血清具有良好的特异性和反应性,且可以应用于病毒的IFA检测。结论成功制备了鼠抗NS1多克隆抗体。
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