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目的：探讨员工分层培训对消毒供应中心（CSSD）工作人员的影响。方法：2014年8月-2015年8月对CSSD 28名工作人员进行分层培训,培训内容包括技能操作、专科理论和科研培训。结果：经过1年的分层培训后,CSSD新进员工、低年资工作人员的理论和技能考核成绩较培训前显著提高（P〈0.05）,临床科室对CSSD的满意度显著高于培训前（P〈0.05）,高年资工作人员发表论文的篇数显著多于培训前（P〈0.05）。结论：对CSSD工作人员进行分层培训,可提高其理论水平和专业技能,促进CSSD专科发展。