胶体金免疫层析试纸条检测芝麻过敏原

来源 :天津科技大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:maradonaargentina
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为了实现芝麻过敏原的快速检测,建立了基于芝麻单克隆抗体间接竞争胶体金免疫层析法.首先通过盐提法提取白芝麻中全蛋白,并使用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定,所提取的全蛋白中含有芝麻主要过敏原Ses i 1和Ses i 2、Ses i 4和Ses i 5,相对分子质量分别为7×10~3~1.1×10~4、1.5×10~4~1.7×10~4.该方法经过优化的检测限(LOD)为1 000μg/L.选用饼干、面包、火腿进行加标回收实验.3种样品提取液稀释8倍后进行检测,结果表明3种样品的检测限均为8 mg/kg.该结果与标准溶液的检测限一致,说明该检测方法具有较好的准确性.该方法可以应用于芝麻过敏原的快速检测,检测时间仅20 min.
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本文采用超声辅助碱液法提取麻渣中的芝麻蛋白,首先对影响提取率的5个因素即固液比、提取液pH、超声温度、超声时间、超声功率分别做了单因素试验,然后在单因素的基础上根据L9(34)设计正交试验,得到最佳提取条件为:固液比1:20、提取液pH值11、超声温度70℃、超声时间50min、超声功率500W。蛋白质提取率为83.38%。
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