黑曲霉原生质体的制备、再生及转化条件

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为了建立原生质体介导的黑曲霉转化系统,研究了菌龄、酶系统、渗透压稳定剂、酶解时间对葡萄糖淀粉酶生产菌株黑曲霉CICIMF0410原生质体形成与再生的影响。结果表明,培养4d的幼嫩菌丝体最适于制备原生质体;综合考虑原生质体形成与再生的情况,作者选用1mol/L山梨醇为最适渗透压稳定剂,1g/dL蜗牛酶-1g/dL纤维素酶-0.1g/dL溶壁酶为最适裂解酶组合,30℃酶解2.5~3h,最适合的原生质体的再生培养基为含0.6mol/LMgSO4的TZ培养基。在PEG和CaCl2存在条件下,以潮霉素B为选择性标记
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