波形蛋白真核表达质粒载体的构建及其在HepG2细胞中的表达

来源 :川北医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wodexuehao
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目的.构建重组人波形蛋白中间丝真核表达质粒载体peDNA3.1-VIM并检测波形蛋白在肝癌HepG2细胞中的稳定表达。方法通过RT.PCR技术从人胎盘组织总RNA中扩增波形蛋白基因,经限制性核酸内切酶BamH I-EcoR I消化,然后插入peDNA3.1(+)载体,脂质体介导重组质粒和空质粒分别转染HepG2细胞,G418筛选稳定表达细胞株,采用免疫细胞化学技术检测目的基因的表达。结果经DNA序列分析和限制性核酸内切酶消化,证实重组载体pcDNA3.1-VIM已正确克隆,建立的稳定细胞株高表达波形蛋白。
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