【摘 要】
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为了应用竞争RT-PCR法检测铜对猪传代肾细胞(PK15)中特异性铜转运蛋白Ctr1基因mRNA表达水平的影响,经2次克隆,将筛选出一段400 bp的核苷酸序列,插入RT-PCR扩增出的530 bp Ctr
【机 构】
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解放军军需大学,黑龙江八一农垦大学,吉林农业大学
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为了应用竞争RT-PCR法检测铜对猪传代肾细胞(PK15)中特异性铜转运蛋白Ctr1基因mRNA表达水平的影响,经2次克隆,将筛选出一段400 bp的核苷酸序列,插入RT-PCR扩增出的530 bp Ctrl目的片段中,构建了插入突变型Ctr1-cDNA竞争模板.再将竞争模板与各试验组cDNA同时进行PCR扩增.结果,猪肾PK15细胞Ctr1基因mRNA表达量在7.8～31.2umol/L Cu范围内随铜添加浓度的升高减少,当铜添加浓度达到62.5 μmol/L时,其表达量又有所回升,呈双相反应.
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