目的:研究缺氧预适应（hypoxic preconditioning,HPC）保护人脐静脉内皮细胞（human umbilical veinous endothelial cells,HUVECs）缺氧/复氧损伤的可能机制。方法:将培养的HUVECs分为5组:对照（Control）组、缺氧复氧（hypoxia/reoxygenation,HR）组、HPC组、HR+自由基清除组（HR+EUK134组）、HPC组+自由基处理组（HPC+H2O2组）。先将Control组和HR组、HR+EUK134组放在常规孵育箱中,而HPC组和HPC+H2O2组放入三气低氧箱中进行3个10 min的缺氧/复氧小循环,即缺氧预适应,再将HR组、HR+EUK134组与HPC组、HPC+H2O2组一起放入三气低氧箱中进行1 h大缺氧。1 h后,向HPC+H2O2组加入H2O2（100 mmol/L）、HR+EUK134组加入EUK134（10 mmol/L）,然后将4组同时放入常规孵育箱复氧2 h。复氧后检测细胞存活率,测定细胞内还原型谷胱甘肽（reductive glutathione,GSH）和氧化型谷胱甘肽（oxidative glutathione,GSSG）内皮型一氧化氮合成酶（endothelial nitric oxide synthetase,eNOS）谷胱甘肽化水平、超氧化物阴离子（superoxide anion,O2.）和一氧化氮（nitric oxide,NO）水平以及抗氧化酶过氧化氢酶（catalase,CAT）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）的活性。结果:与对照组相比,HR组O2.增加（P=0.004）,抗氧化酶活性降低（P=0.000）,细胞内氧化型谷胱甘肽/还原型谷胱甘肽比例（GSSG/GSH）和eNOS谷胱甘肽化水平（P=0.000）均增加,而NO生成减少（P=0.003）。自由基清除剂EUK134和HPC（P=0.028）均可减少O2.生成,增加SOD（P=0.002）和CAT活性（P=0.003）,降低GSSG/GSH和eNOS谷胱甘肽化水平（P=0.001）,NO生成增加（P=0.042）,高浓度H2O2可消除HPC的作用。结论:HPC可提高细胞存活率,恢复内皮细胞eNOS功能活性,其机制可能是通过减轻氧化应激,降低细胞内GSSG/GSH和eNOS谷胱甘肽化水平,促进NO生成而实现。