【摘 要】
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根据人脑钠素（ＨｕｍａｎＢｒａｉｎＮａｔｒｉｕｒｅｔｉｃＰｅｐｔｉｄｅ，ｈＢＮＰ）的ｃＤＮＡ序列，化学合成四条ＤＮＡ片段，经ＰＣＲ延伸扩增，获得全长ＢＮＰ之ｃＤＮＡ。依ＥｃｏＲⅠ和ＰｓｔⅠ位点插入ＰＢＶ２２１表达质粒，构建成ＰＢＶ２２１／ＢＮＰ重组体。依据ｃＤＮＡ片段中ＢｇｌⅡ和ＢａｍＨⅠ切点的共同粘性末端，依次构建成ＰＢＶ２２１／２ＢＮＰ，ＰＢＶ２２１／３ＢＮＰ………ＰＢＶ２２１／８ＢＮＰ等系列克隆，分别含
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根据人脑钠素（ＨｕｍａｎＢｒａｉｎＮａｔｒｉｕｒｅｔｉｃＰｅｐｔｉｄｅ，ｈＢＮＰ）的ｃＤＮＡ序列，化学合成四条ＤＮＡ片段，经ＰＣＲ延伸扩增，获得全长ＢＮＰ之ｃＤＮＡ。依ＥｃｏＲⅠ和ＰｓｔⅠ位点插入ＰＢＶ２２１表达质粒，构建成ＰＢＶ２２１／ＢＮＰ重组体。依据ｃＤＮＡ片段中ＢｇｌⅡ和ＢａｍＨⅠ切点的共同粘性末端，依次构建成ＰＢＶ２２１／２ＢＮＰ，ＰＢＶ２２１／３ＢＮＰ………ＰＢＶ２２１／８ＢＮＰ等系列克隆，分别含有不同拷贝首尾串联的ＢＮＰｃＤＮＡ，经ＤＮＡ测序，证实了所构建串联基因的顺序准确性。
According to the cDNA sequence of human Brain Nintriuretic Peptide (hBNP), four DNA fragments were chemically synthesized and amplified by PCR to obtain full-length BNP cDNA. PBV221 expression plasmid was inserted into EcoR I and Pst I sites to construct PBV221 / BNP recombinant. Based on the cohesive ends of the BglII and BamH I sites in the cDNA fragment, a series of clones of PBV221 / 2BNP, PBV221 / 3BNP, ..., PBV221 / 8BNP were constructed, respectively, containing BNP cDNAs of different copies in series. DNA sequencing confirmed that Sequential accuracy of constructing tandem genes.
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