目的探讨银杏内酯K（ginkgolide K,GK）对中动脉阻塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）损伤大鼠的脑损伤保护作用是否依赖于线粒体Ca²⁺单向转运体（mitochondrial calcium uniporter,MCU）的作用机制。方法成年健康SD大鼠,随机分成5大组:假手术组、模型组、GK+钌红（ruthenium red,RR,MCU拮抗剂）组、GK组和GK+精胺（spermine,SM,MCU兴奋剂）组。采用栓线法制备脑中动脉缺血2 h再灌注22 h的大鼠脑损伤模型;采用Zea Longa 5分制对各组大鼠进行行为学评分;重量法测定脑含水量; 2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色测定脑梗死面积;利用酶联免疫吸附法（ELISA）测定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde,MDA）、一氧化氮（nitric oxide,NO）含量、一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）活性;采用荧光法检测线粒体内[Ca²⁺]i浓度;采用苏木精-伊红（HE）染色观察损伤脑组织形态学的改变;利用Western blot法检测caspase-3/8/9蛋白的表达水平。结果与GK组相比,联合GK+RR组中大鼠神经缺损评分、脑含水量、脑梗死面积比显著降低（P <0. 01）;脑组织MDA、NOS和NO含量减少、SOD活性升高、[Ca²⁺]i显著下降（P <0. 01）,caspase-3/8/9蛋白表达显著降低,然而,联合GK+SM组与GK+RR组药理作用相反。结论 RR能够提高GK对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用,而SM能够减弱GK对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用,其GK作用机制可能与RR或者SM竞争性调节MCU转运能力来抑制线粒体Ca²⁺内流有关。