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目的
研究谷氨酰胺(Gln)代谢与鼻咽癌放疗抵抗的关系及作用机制。
方法采用慢病毒感染技术建立肾型谷氨酰胺酶(GLS1)敲低的人鼻咽癌细胞系CNE1、6-10B及对照细胞系，脂质体转染技术建立GLS1过表达的人鼻咽癌细胞系CNE2及对照细胞系；采用谷氨酰胺酶抑制剂BPTES抑制GLS1的活性；采用Gln/Glu及Glu检测试剂盒检测细胞Gln代谢情况；体外放射克隆形成实验及流式检测细胞凋亡实验检测Gln代谢改变对放疗敏感性的影响；采用Western blot检测Gln代谢改变对自噬相关蛋白的表达；质粒转染LC3-EGFP后观察自噬荧光斑点。
结果Gln分解代谢降低后，体外放射克隆形成能力降低，细胞凋亡增加及细胞自噬水平降低；而分解代谢增加后，体外放射克隆形成能力增强，细胞凋亡降低及细胞自噬水平增加。
结论Gln分解代谢增强，激活鼻咽癌细胞自噬，增加鼻咽癌的放疗抵抗性。