【摘 要】
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目的对肺癌耐药相关基因CA916798的核心启动子区域进行初步鉴定。方法采用PCR方法对CA916798基因上游不同长度的序列片段0H~9H进行扩增,以pGL3-basic载体构建基因报告质粒,转
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目的对肺癌耐药相关基因CA916798的核心启动子区域进行初步鉴定。方法采用PCR方法对CA916798基因上游不同长度的序列片段0H~9H进行扩增,以pGL3-basic载体构建基因报告质粒,转染COS7细胞,荧光素酶检测序列启动活性,酶切鉴定、测序及数据库比对确定核心启动子的可能存在位置,并采用生物信息学方法对核心启动子区域结合位点进行预测。结果成功构建了启动子荧光素酶报告基因;活性实验表明;9H组与阴性对照组比较,相对荧光强度差异具有统计学意义(P<0.05);0H~8H各组与9H组比较,相对荧光强度差异均具有统计学意义(P<0.05);9H片段为处于CA916798基因片段上游179 bp处,长度为568 bp的序列区;功能预测显示该区存在多种细胞因子的结合位点。结论 9H序列区域具有较强的启动活性,为基因CA916798的核心启动子序列区域。
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