【摘 要】
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设计了一段羧基荧光素(FAM)标记的适配体,该适配体能与腺苷进行高亲和力和强特异性的结合,而不与肌苷发生作用.腺苷脱氨酶可以与腺苷发生脱氨反应,生成肌苷.基于上述原理,构
【机 构】
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山西中医药大学中药与食品工程学院,晋中030619;浙江大学药学院,杭州310058;桂林医学院药学院,桂林541004
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设计了一段羧基荧光素(FAM)标记的适配体,该适配体能与腺苷进行高亲和力和强特异性的结合,而不与肌苷发生作用.腺苷脱氨酶可以与腺苷发生脱氨反应,生成肌苷.基于上述原理,构建了碳纳米颗粒-适配体-腺苷荧光适配体传感器用于腺苷脱氨酶的检测.当体系中没有腺苷脱氨酶时,FAM标记的适配体与腺苷紧密结合,而不能被碳纳米颗粒吸附,体系荧光较强;当体系中存在腺苷脱氨酶时,腺苷变成肌苷,肌苷不与适配体结合,此时FAM标记的适配体被碳纳米颗粒吸附,FAM荧光淬灭,体系具有较低的荧光强度.该方法简单、灵敏,线性范围为0.25~3.125 U/mL,检出限为0.18 U/mL.与其它蛋白分子相比,方法对腺苷脱氨酶的检测具有高特异性.构建的传感器简单,再生性好,可用于标准加入法检测小鼠血清中的腺苷脱氨酶.
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