【摘 要】
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建立一种貂肠炎病毒（MEV）微滴数字PCR（ddPCR）方法，对貂肠炎病毒的定量诊断提供技术支持。在实时荧光定量PCR（qPCR）检测方法的基础上，建立了貂肠炎病毒微滴数字PCR方法，优化了该检测方法的反应条件，并评估了其敏感性、特异性、重复性。结果显示，建立的ddPCR方法最佳引物和探针终浓度分别为900和250 nmol/L，最佳退火温度为55℃，最佳升降温速度为2.5℃/s，本方法的最低检测
【基金项目】
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吉林省科技发展计划项目（20200402110NC,20200402036NC）； 2022年吉林省发改委研究课题（2022C042-9）； 中国农业科学院科技创新工程项目（CAAS-ASTIP-2021-ISAPS）；
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建立一种貂肠炎病毒（MEV）微滴数字PCR（ddPCR）方法，对貂肠炎病毒的定量诊断提供技术支持。在实时荧光定量PCR（qPCR）检测方法的基础上，建立了貂肠炎病毒微滴数字PCR方法，优化了该检测方法的反应条件，并评估了其敏感性、特异性、重复性。结果显示，建立的ddPCR方法最佳引物和探针终浓度分别为900和250 nmol/L，最佳退火温度为55℃，最佳升降温速度为2.5℃/s，本方法的最低检测下限为1.07×10~0copies/μL，未发现与常见疫病病毒存在交叉反应，重复性试验的变异系数小于5%。采用该微滴数字PCR和实时荧光PCR对40份水貂肠道、粪便样品进行检测，检测结果与临床检验结果相符。结果表明，本研究中建立的微滴数字PCR方法敏感性高、特异性强、重复性好，适用于临床样品的貂肠炎病毒核酸检测，为貂肠炎病毒感染的早期检测提供了技术支持。
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