【摘 要】
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聚合度26的可溶性纤维寡糖是一种具有多种生物功能的低聚糖，它能够促进双歧杆菌、副干酪乳杆菌等肠道益生菌的增殖，因此对人体肠道微生态具有调节作用。本研究通过在大肠杆菌中表达纤维寡糖磷酸化酶 （cellodextrin phosphorylase， CDP），构建Cc 01菌株，并与之前构建的COS 01菌株联合使用，建立了基于COS 01、Cc 01的三酶级联反应催化底物葡萄糖和蔗糖合成纤维寡糖反应
【基金项目】
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国家重点研发计划项目（No.2017YFD0502102-3）；
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聚合度26的可溶性纤维寡糖是一种具有多种生物功能的低聚糖，它能够促进双歧杆菌、副干酪乳杆菌等肠道益生菌的增殖，因此对人体肠道微生态具有调节作用。本研究通过在大肠杆菌中表达纤维寡糖磷酸化酶 （cellodextrin phosphorylase， CDP），构建Cc 01菌株，并与之前构建的COS 01菌株联合使用，建立了基于COS 01、Cc 01的三酶级联反应催化底物葡萄糖和蔗糖合成纤维寡糖反应体系。经过优化后，最终可溶性纤维寡糖的产量达到97 g/L，纯度约为97%，其中含有纤维二糖 （16.8 wt%）、纤维三糖 （49.8 wt%）、纤维四糖 （16.4 wt%）、纤维五糖 （11.5 wt%）和纤维六糖 （5.5 wt%）。在纤维寡糖对益生菌株生长促进作用的测试中，以菊粉、低聚木糖、低聚果糖为基准，干酪乳杆菌 （WSH 004）、副干酪乳杆菌 （WSH 005） 以及嗜酸乳杆菌 （WSH 006） 利用纤维寡糖 （聚合度2-6） 为碳源进行生长后，益生菌的生物量 (OD600) 相比对照增加约2倍。该研究证明了三酶级联反应能够高效合成纤维寡糖，并表明聚合度2-6的纤维寡糖是一类具有促进肠道微生物增殖的功能性碳水化合物。
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