【摘 要】
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目的 探讨石见穿多糖(polysaccharides from salvia chinensis,PSSC)作用对γδT细胞增殖以及对骨肉瘤细胞杀伤活性的影响及其分子机制.方法 分别采用不同质量浓度的PSSC处理
【机 构】
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430033,武汉市第一医院骨科;430000,武汉市第三医院光谷院区骨科
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目的 探讨石见穿多糖(polysaccharides from salvia chinensis,PSSC)作用对γδT细胞增殖以及对骨肉瘤细胞杀伤活性的影响及其分子机制.方法 分别采用不同质量浓度的PSSC处理γδT细胞和骨肉瘤细胞24、48、72 d,然后以细胞计数试剂盒(CCK-8)检测PSSC对γδT细胞和骨肉瘤细胞增殖的影响,确定PSSC最佳诱导条件.后续实验均采用最佳条件诱导γδT细胞.酶连免疫吸测定(ELISA)检测PSSC诱导前后γδT细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)和γ干扰素(IFN-γ)的水平;流式细胞术细胞术检测γδT细胞穿孔素、颗粒酶素B、CD107a和NK细胞受体G2D(NKG2D)的表达变化.乳酸脱氢酶释放法检测PSSC对γδT细胞杀伤骨肉瘤细胞活性的影响.流式细胞术检测PSSC对γδT细胞诱导骨肉瘤细胞凋亡作用的影响.结果 5.00、10.00、20.00、40.00 mg/L的PSSC均可促进γδT细胞增殖,以20.00 mg/L的PSSC诱导48 h时作用最为明显(P＜0.05).经PSSC诱导后的γδT细胞TNF-α、IFN-γ穿孔素、颗粒酶素B、CD107a和NKG2D的表达显著高于对照组(P＜0.05),对骨肉瘤细胞的杀伤率和诱导凋亡率显著高于对照组(P＜0.05).结论 石见穿多糖能够促进γδT细胞增殖,并增强其对骨肉瘤细胞的杀伤作用和凋亡诱导作用,其机制可能与促进细胞表面穿孔素、颗粒酶素B、CD107a和NKG2D的表达和增加TNF-α和IFN-γ的分泌有关.
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